細胞培養(yǎng)（cell culture）就是從機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細胞，然后在適宜的培養(yǎng)基 中，讓這些細胞生長和增殖。體外細胞培養(yǎng)最常見的是合成培養(yǎng)基如DMEM,F12,MEM等混合一定比例的牛血清進行培養(yǎng)；但是大量使用牛血清制品有許多缺陷，如，動物源成分，無法用于臨床研究；成分復(fù)雜，批間差大，質(zhì)量不穩(wěn)定，重復(fù)性差，影響實驗和生產(chǎn)，而且極易引起交叉污染；所以無血清培養(yǎng)正在替代有血清培養(yǎng)；
染色步驟包括：將培養(yǎng)的細胞或組織樣品制成單細胞懸液，然后將細胞放入管子或酶標板中與熒光標記或未標記的抗體孵育。之后將細胞放入流式細胞儀中進行分析。
ELISA是一種快速、靈敏、準確可靠的一種定量分析方法，樣本的處理對于實驗的成功有著舉足輕重的作用。 利用進行檢測的樣本類型包括常見的血液（血清、血漿），組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清以及不常見的皮膚組織、尿液、糞便、肺泡灌洗液、唾液、腦脊液、胸腹水、前列腺液、精液、陰道分泌物等，這些樣本收集的時間、處理方法和保存都會影響到實驗的結(jié)果。
染色時調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長，組織酸化而影響細胞核著色。因此，要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min，這樣可以使細胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。
細胞死亡是所有生物的基本過程，通過不同的機制發(fā)生。程序性細胞死亡的三種主要類型是凋亡、焦亡和壞死，每一種途徑都使用復(fù)雜的分子和細胞機制。盡管每種途徑都有特定的機制和結(jié)果，但它們具有共同的組成部分和特征。
WB實驗中使用到的有三種抗體：一抗、二抗和內(nèi)參抗體。一抗是唯一針對目標抗原的抗體，可以進行制備也可以購買現(xiàn)貨，難度系數(shù)較高；二抗直接買就OK，只是需要留意下種屬選擇；內(nèi)參抗體必不可少，是WB實驗中的質(zhì)控環(huán)節(jié)。
抗體和重組蛋白無論是保存還是運輸，請避免反復(fù)凍融。反復(fù)凍融，冰晶會破壞抗體和重組蛋白的空間結(jié)構(gòu)，導致蛋白變性形成多聚體和重組蛋白構(gòu)象改變，從而降低抗體的結(jié)合能力，也加快了抗體球蛋白和重組蛋白的降解速度?？贵w和重組蛋白保存得當與否，直接決定了抗體和重組蛋白的活性使用效果，如果保存得當，抗體和重組蛋白活性大部分都可以維持數(shù)年。
PBS緩沖液是一種廣泛應(yīng)用于生物化學實驗中的緩沖溶液，它的全稱是Phosphate Buffer Saline (PB)，中文通常稱為"磷酸鹽緩沖鹽溶液"或者"磷酸鹽緩沖生理鹽水"。這種溶液之所以能夠保持穩(wěn)定的pH值，主要得益于其中的磷酸緩沖對（H2PO4-和HPO42-）。
