化學試劑是符合一定質(zhì)量要求標準的純度較高的化學物質(zhì),它是分析工作的物質(zhì)基礎(chǔ)。試劑的純度對分析檢驗很重要,它會影響到結(jié)果的準確性,試劑的純度達不到分析檢驗的要求就不能得到準確的分析結(jié)果。能否正確選擇、使用化學試劑,將直接影響到分析實驗的成敗、準確度的高低及實驗的成本,因此,儀器使用人員必須充分了解化學試劑的性質(zhì)、類別、用途與使用方面的知識。
有些生物堿能和某些試劑反應(yīng)生成特殊的顏色,叫做顯色反應(yīng),常用于鑒識某種生物堿。但顯色反應(yīng)受生物堿純度的影響很大,生物堿愈純,顏色愈明顯。
工作標準品質(zhì)量標準的建立 要首先建立工作標準品的質(zhì)量標準,總的原則是在原法定標準的基礎(chǔ)上建立,該標準要嚴于藥典標準。要將主成份含量提高,有關(guān)物質(zhì)的限度降低,其它項目可不變。
PCR 全過程包括三個基本步驟,即雙鏈 DNA 模板加熱變性成單鏈(變性);在低溫下引物與單鏈DNA互補配對(退火);在適宜溫度下 Taq DNA 聚合酶以單鏈 DNA 為模板,利用4種脫氧核苷三磷酸(dNTP)催化引物引導的 DNA 合成(延伸)。這三個基本步驟構(gòu)成的循環(huán)重復(fù)進行,可使特異性 DNA 擴增達到數(shù)百萬倍。
試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標之一,但不能反映試劑質(zhì)量的全部。試劑成份、純度、用量及穩(wěn)定性,才是保證試劑質(zhì)量的關(guān)鍵所在。目前市售的一些試劑具有抗干擾作用,主要是通過加入抗干擾物質(zhì)或使用新的色素原以避免內(nèi)源性物質(zhì)的干擾。
擴增序列的殘留污染大部分是假陽性反應(yīng)的原因,樣品間的交叉污染也是原因之一。因此,不僅要在進行擴增反應(yīng)是謹慎認真,在樣品的收集、抽提和擴增的所有環(huán)節(jié)都應(yīng)該注意